現(xiàn)今COVID-19在世界各地造成大規(guī)模疫情，而引起COVID-19的新型冠狀病毒SARS-CoV-2主要是透過接觸及飛沫傳染，目前臨床上多使用鼻咽拭子採樣，並以RT-qPCR偵測(cè)檢體中病毒核酸的含量。隨著COVID-19的全球流行性大爆發(fā)，如何在短時(shí)間內(nèi)快速又高效地篩檢出SARS-CoV-2便成了至關(guān)重要的議題。
面對(duì)臨床上海量的病患檢體，檢測(cè)人員除了需耗費(fèi)大量時(shí)間處理及檢測(cè)檢體外，亦需承受處理檢體時(shí)受感染的風(fēng)險(xiǎn)。因此，為了減少操作時(shí)間及降低檢測(cè)人員受感染的風(fēng)險(xiǎn)，岑祥公司現(xiàn)提供您快速及高效的解決方案──COVID-19半自動(dòng)檢測(cè)流程！
檢測(cè)人員需耗費(fèi)大量時(shí)間在收集、儲(chǔ)存和管理檢體，但只要選用Micronic冷凍小管就能輕鬆解決管理檢體的問題！Micronic的冷凍小管附帶2D 條碼，搭配ULT條碼凍盒(凍盒可根據(jù)凍管選配)，透過DR700 Rack Reader，便可直接讀取凍盒內(nèi)凍管中所記錄的全部檢體資訊，再使用Micronic的LIMS管理軟體就能輕鬆且有條理地管理大量檢體。除此之外，Micronic提供各種體積的冷凍小管(0.3-6ml tube)，亦可選擇內(nèi)、外旋蓋子(internal/external cap)及壓蓋(push cap)/旋蓋(screw cap)設(shè)計(jì)，可依據(jù)各種需求選擇最適合儲(chǔ)存樣品的產(chǎn)品。
對(duì)檢測(cè)人員來說檢體前處理也是一大挑戰(zhàn)，因?yàn)樾韬馁M(fèi)冗長時(shí)間一一打開凍管蓋子再關(guān)上外也需要承受處理檢體時(shí)受感染的風(fēng)險(xiǎn)。為了降低受感染的風(fēng)險(xiǎn)及處理的時(shí)間，Micronic提供CS700自動(dòng)開蓋/關(guān)蓋機(jī)(decapper/recapper)，不論凍管是使用24/48/96 well形式的rack，都可交由機(jī)器自動(dòng)開關(guān)蓋(而且是放在凍盒rack中就可處理，不用把凍管一個(gè)個(gè)拿起來喔)；搭配Blue-Ray Biotech的 的 EzMate自動(dòng)移液系統(tǒng)，能在短時(shí)間內(nèi)一次處理24、48、甚至96個(gè)檢體，不論是加lysis buffer或是後續(xù)加入PCR mastermix皆可使用此方式，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)省時(shí)又省力。
其後可透過兩種不同的自動(dòng)核酸萃取系統(tǒng)，Chemagen磁珠分離系統(tǒng)chemagic^TM 360與Catchgene Silica-membrane colum系統(tǒng)iCatcher 12來分離病毒DNA/RNA。接下來，利用Blue-Ray Biotech 的 EzDrop 1000偵測(cè)核酸濃度及確保核酸品質(zhì)，最後便可進(jìn)行最關(guān)鍵的PCR檢測(cè)步驟。
關(guān)於PCR檢測(cè)，Blue-Ray Biotech可提供兩種高效又穩(wěn)定的PCR機(jī)型，TurboCycler Lite與TurboCycler 2，除此之外，Blue-Ray亦提供可進(jìn)行RT-qPCR的TurboQ機(jī)臺(tái)。透過這些機(jī)器，最終只要以電腦分析即可獲取檢驗(yàn)結(jié)果。

想在低風(fēng)險(xiǎn)的情況下快速且高效地進(jìn)行COVID-19檢測(cè)?
岑祥公司的COVID-19半自動(dòng)檢測(cè)流程幫您做到！

專為使用H2O2蒸氣滅菌的製藥、食品和醫(yī)療設(shè)備行業(yè)而設(shè)計(jì)的Mesa Labs Apex生物指示劑產(chǎn)品，以對(duì)H2O2最具抵抗力的菌株Geobacillus stearothermophilus 12980、及304等級(jí)不銹鋼載體，不會(huì)吸收過氧化氫氣體，並以獨(dú)家技術(shù)進(jìn)行孢子塗層，確保每一載體上的孢子皆是單層堆疊，免除VHP去污過程的假陽性結(jié)果。


為確保每一次的滅菌確效都是有效的，實(shí)驗(yàn)室端通常會(huì)以內(nèi)控流程去抽檢每一批號(hào)的生物指示劑是否有達(dá)被要求的菌數(shù)? 而菌數(shù)要求被USP 55規(guī)範(fàn)，必須介於原廠宣稱結(jié)果的50-300%。然而，不同實(shí)驗(yàn)室間的檢測(cè)流程、設(shè)備型號(hào)、設(shè)備準(zhǔn)確度、培養(yǎng)基種類…等，是不會(huì)完全相同的，因而產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的差異。因此ISO 14161:2000 (對(duì)終端用戶的要求)其中11.1及11.2有提及，當(dāng)使用者的測(cè)試結(jié)果與製造商不同時(shí)，應(yīng)向製造商諮詢，以確保與製造商使用的是相同的測(cè)試流程、測(cè)試結(jié)果具有可比對(duì)的意義。
<ISO 14161:2000>
11.1 “If the user establishes data on the nominal population count or the D-value and these are outside the limits required by the relevant standards or outside the label information, the user is encouraged to seek information from the manufacturer to ensure that the same techniques, methods, and conditions are used to obtain the data.”
11.2 “When tested, the number [of organisms] can be higher or lower than the labeled number because variations in testing procedures can influence the resulting data. The biological indicator manufacturer should be consulted to ensure that the same techniques and procedures are used…Different laboratory practices and even variations in the performance of the individual personnel can lead to different results…The user should follow the manufacturer’s recommended procedures for recovery to ensure comparable results…”
在過往的例子中，有幾個(gè)常被使用者忽略的考量因素，像是(1)稀釋管的使用，在連續(xù)稀釋的過程中，一般建議使用玻璃試管，而非塑膠試管，避免孢子沾黏於塑膠試管，最終導(dǎo)致菌數(shù)回收率下降；(2)在進(jìn)行Heat Shock與立即冷卻的步驟時(shí)，除了溫度、時(shí)間的掌控必須精準(zhǔn)外，使用較小的試管或圓底試管可能會(huì)使得孢子聚集而受熱不均，因而降低Heat Shock效能(原廠建議使用19.5 x 145 mm的平底玻璃管；(3)部分實(shí)驗(yàn)室會(huì)使用培養(yǎng)基準(zhǔn)備較容易的”塗盤法(spread plate) ”將孢子接種，然而塗盤法，可能會(huì)造成孢子生長區(qū)域較小而不容易生長成肉眼可見的菌落大小、或是產(chǎn)生swarming的狀況造成計(jì)數(shù)上的誤差，因此原廠建議使用”傾注法(pour plate)”接種孢子。


從Apex不銹鋼載體機(jī)械分離孢子的潛在差異
除了上述3個(gè)因素外，孢子分離更是個(gè)非常重要的環(huán)節(jié)，Mesa Labs建議各實(shí)驗(yàn)室在使用超音波震盪器(sonicator)將孢子從不鏽鋼載體分離時(shí)，執(zhí)行in-house的測(cè)試流程，並求特別留意下述幾點(diǎn):
1. ”超聲處理之前脫氣”是重要的步驟，這部分會(huì)直接影響到孢子是否有從載體上完全分離，因此在放入孢子樣品前，事先啟動(dòng)超音波震盪器運(yùn)作5 min，讓水域中的氣體被震出(脫氣)，實(shí)際執(zhí)行孢子樣品的超音波震盪時(shí)，震波才會(huì)完全針對(duì)樣品作用，而非有一部分震波用於脫氣。
2. 避免將孢子樣品直接放置超音波震盪器底部，底部傳導(dǎo)和水浴傳導(dǎo)的效能是不同的，也盡可能以金屬架而非塑膠架，塑膠架相較容易吸收震波強(qiáng)度。
3. 超音波震盪器的效能與震波方向皆不相同，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)評(píng)估最適合的轉(zhuǎn)動(dòng)頻率，在整個(gè)超音波震盪過中增加移動(dòng)的頻率、方向，可以讓每一樣品更均勻受到超音波作用。
同樣的產(chǎn)品，會(huì)因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室間的檢測(cè)流程與相應(yīng)的設(shè)備耗材不同，而有不同的檢測(cè)結(jié)果。向製造商諮詢除了可以細(xì)節(jié)了解差異造成的影響，也同時(shí)藉由原廠長年的經(jīng)驗(yàn)去修改目前出最適合、也最接近建議方法的實(shí)驗(yàn)流程，確保不同結(jié)果是可相互比對(duì)的，更有助於實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性，進(jìn)而獲得更真實(shí)的菌數(shù)回收率。