功能說明
DMSO屬於非質(zhì)子極性溶劑,常用於化學(xué)反應(yīng)、PCR反應(yīng)以及在細(xì)胞、組織和器官的保存中用作玻璃化低溫冷凍防護劑。 DMSO用於細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基內(nèi),可以保護細(xì)胞免受冰晶引起的機械性損傷。它也可以用於主培養(yǎng)、亞培養(yǎng)、重組異倍體、雜交瘤等系列細(xì)胞株,胚胎幹細(xì)胞(ESC)和造血幹細(xì)胞的冷凍保藏。另外常常與BSA或FBS混合使用。
其它說明1
用 途:
(1)DMSO廣泛應(yīng)用在人、動物細(xì)胞株及細(xì)菌噬菌體λ的低溫防護中,製備DMSO溶液用來冷凍細(xì)胞的步驟如下:
A.配製冷凍培養(yǎng)基:含有細(xì)胞培養(yǎng)用培養(yǎng)基、10-20% 血清和5-10% DMSO
B. 用胰酶或其他合適的方法消化貼壁細(xì)胞;(細(xì)胞最好處於對數(shù)增長期)
C. 低速離心(4 °C,250 × g, 10min)收集細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基
D. 用冷凍培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞,使細(xì)胞密度為106 -107 cells/ml
E.平均分配細(xì)胞,裝入凍存管內(nèi)
F. 依照標(biāo)準(zhǔn)凍存程序冷凍細(xì)胞,凍存在-70 °C 或更低的溫度內(nèi)
(2)細(xì)胞融合時,40-50% PEG 溶液內(nèi)加入10% DMSO;
(3)有文獻報導(dǎo)DMSO作為緩衝液的成分,用於以下的實驗:Poly(A+)RNA的純化, E. coli感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化、PCR反應(yīng)、cDNA文庫的擴增、DNA測序、DEAE-葡聚醣介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染、聚凝胺介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)染;
(4)有相應(yīng)的程序描述到用DMSO回收膜過濾後的DNA,用於接下來的PCR擴增反應(yīng);
(5)用於DNA測序的毛細(xì)管電泳技術(shù)將5% DMSO (v/w)混入2 M尿素中,如果需要可以調(diào)整DMSO濃度到100%。
(6)有研究報導(dǎo)不同濃度的DMSO與寡核苷酸的熔點溫度關(guān)係;
(7)有研究描述利用DMSO提高雜交瘤細(xì)胞中單克隆抗體的產(chǎn)量; 調(diào)查發(fā)現(xiàn)低溫冷凍前用含有DMSO的培養(yǎng)基高溫培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。
(8)文獻報導(dǎo)利用DMSO修飾蛋白中的磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸殘基用作磷酸化狀態(tài)的質(zhì)譜分析(MS);
(9)文獻報導(dǎo)水和DMSO中的亮脯利特(Leuprolide)降解作用